众所周知，胶质瘤具有侵袭性高、「像树根一样扎根于脑组织」、边界不清等特点，因而要做到完全切除肿瘤非常困难。所有有助于提高胶质瘤切除程度的方法都是神经外科医生关注的热点，为了达到这一目的，神外医生们不仅想方设法给肿瘤染上颜色后再做手术（荧光引导下手术），还将超声搬到了手术室（术中超声），又将磁共振搬到了手术室（术中磁共振）……
而这一次，神外医生 Vladislav Pavlov 又将做实验常用的病理检查神器探头式共聚焦激光显微内镜（pCLE）搬到了手术室（术中 pCLE 辅助）。来看下这篇发表在 Neurosurgery 上的文章吧。
这是一项单中心前瞻性的研究，研究纳入 2014 年 9 月到 2015 年 1 月收治的 9 例脑胶质瘤患者，其中男性 6 例，女性 3 例，年龄在 27~75 岁，平均 58.6 岁。
共有 6 例施行开颅肿瘤切除术（4 例在全麻下、2 例在局麻清醒下手术），3 例因不能手术而行立体定向活检。本研究用 Cellvizio 系统进行 pCLE 图像采集（图 1）。
图 1 pCLE 探头的处理方式，A、B 分别为开颅手术和立体定向活检。A：可见位于脑组织表面 2.36 mm 的探头；B：标准活检针是侧面开孔（橘黄色圆圈所示），与 0.86 mm 的图像采集探头不兼容。因此，研究设计了一个特殊的具有末端开孔的探针（红色圆圈所示）
本研究中有 3 例用 5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）（术前 4 h 口服）做造影剂，6 例用静脉内荧光素（pCLE 图像采集前注射）做造影剂。研究实施的具体步骤如图 2（开颅手术）和图 3（立体定向活检）所示。
图 2 开颅手术过程中可视化图像获取步骤（开颅手术）
图 3 开颅手术过程中可视化图像获取步骤（立体定向活检）
研究中典型图像展示如下：
图 4 WHO Ⅱ级少突星形细胞瘤正常脑组织及肿瘤样组织 pCLE 图像（未用造影剂）。A：pCLE 图像中的白色斑点显示正常脑组织中神经元的自体荧光；B：荧光显微镜检查（绿色，788nm）下的神经元自体荧光图像，神经元细胞质呈浅绿色，与 pCLE 图像表现一致（A 所示）；C：受肿瘤细胞侵犯的白质 pCLE 图像显示其也包含有白色光斑，密度相对较低。综上可推测，并非所有的白斑都是肿瘤浸润所致，也有部分可能是皮质下神经元自体荧光
图 5 以荧光素为造影剂的 pCLE 图像，以及与之相对应的组织病理学图像。A，F：正常脑组织；B，G：WHO Ⅱ级少突星形细胞瘤；C，H：WHO Ⅲ级少突星形细胞瘤；D，I：WHO Ⅳ级胶质母细胞瘤；E，J：恶性 B 细胞淋巴瘤
图 6 以 5-ALA 为造影剂的 pCLE 图像。A：正常皮质；B，C：典型的胶质母细胞瘤实体部分肿瘤组织；D：正常皮质组织病理学图像；E：胶质母细胞瘤实体瘤组织病理学图像；胶质母细胞瘤实体部分肿瘤组织肉眼可见的荧光成像
本研究共计完成活检的区域达 24 处，pCLE 图像采集 75 次，肿瘤性质包括胶质母细胞瘤（4 例）、低级别胶质瘤（即 WHO Ⅰ级和Ⅱ级胶质瘤，共 2 例）、WHO Ⅲ级少突星形细胞瘤（2 例）、淋巴瘤（1 例）。
重要的是，所有患者手术/活检过程顺利，无任何 pCLE 或造影剂相关的并发症出现。
作者指出，本研究将 pCLE 应用于脑胶质瘤切除手术/活检过程中，这在临床上是第一次。结果证明，pCLE 有助于区别正常脑组织与受脑胶质瘤侵犯的组织。
这一小样本量的尝试得出的结果显示，术中 pCLE 在神经外科脑胶质瘤切除手术中是可行的。由于样本量太小，本研究未进行其特异性和准确性的评估。后续进一步的研究会扩大样本量，补充这一点，让我们拭目以待。
